琦琦 發問時間: 社會與文化語言 · 1 0 年前

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The standard procedure for Shigella spp. detection is based on isolation of Shigella by selective culture media followed by identification by biochemical tests and agglutination assays. This process may take 48–72 h or even longer to obtain results. Since shigellae are very fastidious organisms, appropriate collection, rapid transport to the laboratory and rapid plating of the sample are important for isolation. Such conditions are often difficult to attain in developing countries. Thus, rapid, highly sensitive and specific techniques based on genetic characteristics have been developed. DNA hybridization and PCR are the best known of these techniques and are often used as tests for the detection and identification of pathogenic microorganisms. Several PCR protocols for detection of Shigella in faeces, food, and some in water ( Bej and Bej) have been published. These protocols use primers directed at sequences located on the invasion plasmid of Shigella spp. and EIEC, or on both the plasmid and the chromosome . The major obstacle to using PCR for the detection and identification of pathogenic organisms from clinical samples or environmental water samples is the presence of substances that are inhibitory to PCR . This obstacle can be minimized by direct chemical extraction of nucleic acids, immunomagnetic separation (IMS) of bacteria with antibodies , or buoyant density gradient centrifugation, but these procedures are laborious and expensive.

In this paper, we describe the highly sensitive and specific detection of virulent Shigella organisms and EIEC by seminested PCR combined with a short enrichment step. The sensitivity of the procedure was determined by using artificially seeded ground and surface water samples collected from different natural sources.

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  • 匿名使用者
    1 0 年前
    最佳解答

    Shigella spp的標準程式。 察覺因為透過生物化學的試驗和凝集作用分析隨后有鑑定的選擇的文化媒介基于Shigella的隔離。 這個過程可以採取48 V72 h或者甚至更長時間獲得結果。 因為shigellae是非常愛挑剔的生物體,適當的收集,去實驗室和迅速的這個樣品的繪製的地圖的迅速的運輸船用于隔離重要。 這樣的條件經常難在開發中國家取得。 因此,基于遺傳學的特性的迅速,非常敏感和具體的技術已經被發展。 知道這些技術,DNA 雜交和PCR是最好的,經常被為病原的微生物的察覺和鑑定作為試驗使用。 幾份PCR在糞便裡的Shigella的察覺,在水(Bej和Bej)裡的食品和一些的協議已經被出版。 這些協議使用在位于Shigella spp的侵略plasmid的順序指引的入門。 以及EIEC,或者在plasmid和染色體上。 主要的障礙為了為來自臨床的樣品或者環境水樣品的病原的生物體的察覺和鑑定使用PCR是 對PCR 禁止的物質的存在。 這個障礙可能因為nucleic酸的直接的化學製品抽出被使減到最小, 有抗體或者能浮的密度坡度centrifugation的細菌的immunomagnetic 分離(IMS),但是這些程式是艱苦和昂貴的。

    在這篇文章裡,我們描述與短的富裕相結合的seminested PCR的惡性的Shigella 生物體和EIEC的非常敏感和具體的察覺走。 人工結子從不同的自然的來源收集的地和地面水樣品,程式的敏感性透過使用被確定。

  • 匿名使用者
    1 0 年前

    Shigella spp的標準程式。 察覺因為透過生物化學的試驗和凝集作用分析隨后有鑑定的選擇的文化媒介基于Shigella的隔離。 這個過程可以採取48 2 h或者甚至更長時間獲得結果。 因為shigellae是非常愛挑剔的生物體,適當的收集,去實驗室和迅速的這個樣品的繪製的地圖的迅速的運輸船用于隔離重要。 這樣的條件經常難在開發中國家取得。 因此,基于遺傳學的特性的迅速,非常敏感和具體的技術已經被發展。 知道這些技術,DNA 雜交和PCR是最好的,經常被為病原的微生物的察覺和鑑定作為試驗使用。 幾份PCR在糞便裡的Shigella的察覺,在水(Bej和Bej)裡的食品和一些的協議已經被出版。 這些協議使用在位于Shigella spp的侵略plasmid的順序指引的入門。 以及EIEC,或者在plasmid和染色體上。 主要的障礙為來自臨床的樣品或者環境水樣品的病原的生物體的察覺和鑑定使用PCR是對PCR 禁止的物質的存在。 這obs tacle可能因為nucleic酸的直接的化學製品抽出被使減到最小, 有抗體的細菌的immunomagnetic 分離(IMS), 或者能浮的密度坡度centrifugation, 但是這些程式是艱苦和昂貴的。 在這文章內,我們描述極毒Shigella 生物體和EIEC 以短的富裕走的與相結合的seminested PCR的非常敏感和具體察覺。 人工結子從不同的自然的來源收集的地和地面水樣品,程式的敏感性透過使用被確定。

    參考資料: 翻好久{累死嚕}
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