天河廣樹 發問時間: 科學植物學 · 1 0 年前

詢問西方墨點法藥劑原理

我從事植物蛋白質方面的研究

對於西方墨點法的步驟及原理已經了解

但是我想詢問裡面的藥劑 1.blocking solution 2.TBS 3.TBSTT

是扮演什麼角色 加入這些的功用是什麼?

請多指教

1 個解答

評分
  • Susan
    Lv 5
    1 0 年前
    最佳解答

    blocking solution裡面最重要的是脫脂牛奶

    脫脂牛奶裡面的蛋白質會均勻的附著在你的membrane上

    這樣在進行後續的antibody reaction時才不會有太多nonspecific reaction的現象

    如果都沒有加脫脂牛奶或是BSA等蛋白質先覆蓋你的membrane時,

    加入antibody(這也是一種蛋白質)就會到處覆蓋

    產生nonspecific reaction

    至於說另外兩個溶液

    他只是用來提供反應需要的標準鹽濃度而已

    裡面會加一些介面活性劑(如tween 20)來減少nonspecific reaction

    參考資料: 本身經驗
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