PI PI 豬 發問時間: 科學生物學 · 1 0 年前

何謂 genomic DNA library 與 cDNA

請問 genomic DNA library 與 cDNA library 它們各有哪些用途 ? 來自於哪裡 ? 而有什麼影響 呢?

1 個解答

評分
  • 1 0 年前
    最佳解答

    genomic library包含了 基因整個DNA片段。 含有primer或是promotor等等~

    而 cDNA library 則包含 來自細胞基因所表現的mRNA的complementary DNA

    合成片段。

    cDNA Library------------------

    1. cDNA library的優點是它只有包含有被表現的基因序列(即exon)。

    2. 在prepare 一個 cDNA library的第一個步驟就是要把我們有興趣的DNA片段所transcription出來的mRNA 分離出來。

    3. 由於真核生物的 mRNAs 尾巴的部份有 poly-Al, 所以能夠很容易地被分離。 4. 然後利用反轉錄酶來合成互補的DNA片刻。

    5. 之後把這一段新合成的單股DNA在 DNA polymerase的幫忙下合成變為雙股的DNA分子。

    6. 做好的雙股線性 DNA分子再去與plasmid或是其他的vector(載體)轉殖入細菌胞內。

    7. 最後進行 clone的動作。

    Genomic Library

    1. genomic library則是利用限制酶來切出我們所要的DNA片段(雙股DNA)。

    2. 被切出的片段包括primer及intron等非表現序列。

    3. 切出的序列同樣去做分離與應用vector 來做轉殖與clone。

    ~~~~~~cDNA library ~~優點~~

    1. 不含intron的sequence,所以大量減少我們處理DNA的總量

    (也就是被精簡化了)

    2. 可以應用在特殊組織環境中。

    ~~~~genomic DNA library ~~~~~~~

    含有primer及其他控制gene表現片段,無需另加pimer,相對處理上步驟較少

    參考資料有圖.......

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