wendy 發問時間: 社會與文化語言 · 1 0 年前

電泳時為何要使用TBE?

what would occur if the gel box is filled with water instead of TBE buffer?

if water is used to prepare the gel instead of TBE buffer?

if the electrodes are reversed?

麻煩幫幫我!

等等要交報告了阿阿阿

1 個解答

評分
  • 1 0 年前
    最佳解答

    所謂TBE buffer 是包含有三樣東西:

    10x TBE Buffer (Tris-Borate-EDTA)

    108 gm Tris base

    55 gm Boric acid

    9.3 gm Na4EDTA

    Add ddH2O to 1 liter.

    其中Tris base 和 Boric acid 分別提供帶有正負電的鹼離子跟酸離子,因此使buffer具有緩衝pH值的效果,另外,因為酸鹼離子的存在,使他同時也有電解液的效果,這樣整個電泳系統才能運作。

    第一個問題:

    所謂電泳系統,就是讓系統中維持穩定的電流,如果沒有buffer只用純水的話,因為水的分子很穩定,不太容易解離出帶電的離子,所以穩定的電流就無法產生囉。

    第二個問題:

    如果用純水來配膠,由於跑時會讓gel跟外面buffer的solution濃度不同,所以跑起來結果惠很醜;補救的方法,是loading sample前先預跑個10分鐘左右,讓buffer裡的離子跑到gel裡面,支後再loading就會比較好。

    不過由於gel狠便宜,所以要視發現了直接重配一片可能比較簡單。

    第三個問題:

    如果電極裝反,那跑的方向自然就180度相反囉。

    參考資料: 自己
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