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Lv 5
? 發問時間: 科學化學 · 1 0 年前

管柱色層分析相關問題........

有時候沖提液與Loading樣品進去所要溶的極性差太多 造成樣品析出或先跑的狀況 請問該怎麼辦呢

已更新項目:

YJ大師說的是乾填法 但是如果都用乾填不是會發生Sample卡在si膠上

造成產率下降...

2 個已更新項目:

YJ大師你好

一般都說rf值等於0.3的tlc條件來沖洗管柱效果最好 但是如果是混點 分離的話 要以哪個點為rf值為0.3呢(這裡指點很接近 不是幾乎重疊的那種) 我看麻省理工有一門線上課程 化學技術影片 但是講的是英文聽起來似懂非懂 故有此疑問

3 個解答

評分
  • Yy
    Lv 7
    1 0 年前
    最佳解答

    因您沒說清楚 猜您的意思是以silica gel column chromatography 進行分離純化

    先將樣品在圓底燒瓶溶於可溶的溶劑中 假設管柱層析第一種流洗液 eluent 是hexane-ethyl acetate (9:1) 而那樣品不溶於此溶劑 您可用ethyl acetate 去溶你的樣品 甚致於用acetone 或甲醇也無防 完全溶解後 加進1.1倍至1.2倍silica gel (以樣品重量算 如果樣品重1克 則silica gel加1.1克) 混和後減壓濃縮 至完全乾 (判斷: 在rotavapor上的圓底燒瓶內 可看見粉掉出來) 然後以稱藥匙將圓底燒瓶內刮出 如果仍是黏黏的 則需再加進可溶的溶劑重新再溶 再加入silica gel (silica gel 儘量不要超過樣品重量的1.5倍)混和後減壓濃縮 至完全乾

    以上的樣品-silica gel乾粉 可loading 管柱了 先將column內的溶劑流至剛蓋在silica gel表層上 小心倒進樣品-silica gel乾粉 然後以既定流洗的溶劑

    2007-04-29 22:55:22 補充:

    Sample不會卡在si膠上 要注意以上方法不是直接加樣品乾粉在矽膠上 而是樣品先覆蓋在矽膠上再加進矽膠管柱中 再來不是只用一個溶劑作流洗 而是以梯度流洗 即以增加更極性溶劑的比例 先以TLC找樣品Rf=0.3 的流洗液系統(例如己烷: 乙酸乙酯=9:1) 先以這系統沖提 在看到第一點出完後 或很久仍沒見 可增加乙酸乙酯比例(例如己烷: 乙酸乙酯=8:2) 如此類推 如果仍擔心有Sample不會卡在si膠上 最後以甲醇沖洗

    2007-04-29 23:57:03 補充:

    因TLC分離效果比管柱好 原因是其顆粒比用於管柱的小 所以如果有混合物而且其很接近的話 用Rf=0.3 的流洗液系統 以混合物在TLC最高點算 而且用梯度流洗 不用怕分不開 只要在TLC上能分開

    2007-04-30 00:00:29 補充:

    好好把以下這篇看看

    http://siggy.chem.ucla.edu/VOH/136/Flash_Chromatog...

    以後想從事新藥研發 或讀研究所 更應把英文能力提高

    2007-04-30 00:02:26 補充:

    以後想從事研究工作或藥師 更應培養觀察力與細心

    我是Yy 不是Yj

    2007-04-30 00:07:27 補充:

    看您的問題紀錄 該是剛讀藥學系 但本問題是研究所程度 請問您在跑實驗室嗎 還是有機實驗遇到的問題

    2007-04-30 22:42:27 補充:

    因TLC分離效果比管柱好 混合物用TLC可清楚分開 而管柱用TLC溶劑系統的話 如果混合物分得很開 不難分開 便如過濾般 但是如果混合物在TLC已很接近的話 管柱用TLC一樣系統 混合物很快便流洗出來 而且沒分開 所以用Rf=0.3的系統 是的 在這條件 在TLC上也分不開 但是這系統可使混合物在管柱滯留久些 多些與矽膠及溶劑交互作用 因此分純

    2007-05-02 17:53:26 補充:

    如果是天然來源的類黃酮 因化學結構類似物很多 所以難分 可先用管柱粗分成多個fractions 再用另一管柱細分 如果仍分不純 可再以TLC或HPLC分純

  • 匿名使用者
    6 年前

    下面的網址能回答你的問題

    http://phi008780420.pixnet.net/blog

  • ?
    Lv 5
    1 0 年前

    您好我是嘉藥藥學的學生 目前就讀三年級但我對藥物設計有興趣 所以跑到化學系跟做有機的老師 我流的東西是黃酮類 非常難分 雜點都很近 有時真懷疑是不是我技術有問題

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