幸福 發問時間: 科學生物學 · 1 0 年前

PCR、RFLP及電泳的問題.............

一、我做的基因是人類的drd2、TPH、5-HT2C、ADRA2A、serotonin transporter等基因,

想請問一下各位高手,有沒有那個資料庫能查詢這些基因的電泳圖的呢?除了找paper這個

方法之外,有無這種電泳資料庫呢?對了,我做的基因都是人家做過的。

二、PCR完後跑電泳結果老是很弱,甚至比primer dimer還弱,請問我能怎麼改進呢?降低

annealing溫度(可是已經降到50度了耶)、換dna(因為dna老舊嗎?)、稀釋dna?或是

減少DNTP的量(因為會搶鎂離子嗎?)?這些我都還沒試過,還有其他方法嗎,這些方法

的測試優先次序為何?補充說明我的DNA是口腔棉棒萃取出來的。

三、老師跟我說pcr產物要很亮很強才能做RFLP,請問這是真的嗎?是不是切出來之片段

還會更弱所以看不到呢?還是說產物不夠亮有變通方法呢?

四、爬文發現有些試劑重複凍、融會嚴重影響實驗結果,所以應分裝,所以DNA要分裝,那

dntp、buffer也會有這麼嚴重的影響嗎?還是說上述兩者較不易壞?

已更新項目:

補充一下第一個問題,除了電泳圖外,還有沒有基因頻率可查呢?謝謝

2 個已更新項目:

產物不夠亮代表dna的量不足,再讓限制酶去切,切出來的片段訊號一樣會很弱。很弱代表還是會看到是這樣嗎?另外,可以說在配製切割產物時將pcr產物量放多一點,這樣有幫助嗎?謝謝

2 個解答

評分
還有問題?馬上發問,尋求解答。