帶刺圓仔花 發問時間: 科學生物學 · 1 0 年前

請問PCR可應用價值?

知道的人可以用條列式說明一下嗎..?

因為我最近有學到有關PCR的原理..

不過PCR在醫學應用上還有遺傳工程的應用價值有哪些呢...?

1 個解答

評分
  • 陳皓
    Lv 6
    1 0 年前
    最佳解答

    PCR的應用:

    1. PCR products can be sequenced directly (asymmetric PCR)

    DNA定序的樣品必須是單股,因此操作『不對稱PCR』,

    亦即加入不等濃度的兩種Primer (約相差100 X),經幾個PCR cycle後 (用盡低濃度primer),

    便能得到高濃度primer延伸所得的單股DNA。

    2. For sex determination

    以PCR放大的能力,敏感的擴大Y染色體上某個特定的基因,如DYZ 1 sequence。

    藉抽取羊水 (含胎兒脫落的表皮細胞),以PCR檢測是否增殖出DYZ 1序列,

    便知是否男性。(男性為XY,能出現預期擴增的特定序列)

    3. To detect bacterial or viral infection

    以PCR敏感放大樣品中某特定感染病源的核酸序列,

    便知是否有該病原菌的感染,可大大縮減檢測病源體的時間。

    4. For monitoring cancer cell derived from chromosomal translocation

    某些腫瘤的發生原因是由於染色體的移位,藉特定primer的設計,

    檢測是否擴增出染色體移位後的特定片段,便能及早測知是否腫瘤復發。

    5. For cloning a single cDNA (RT-PCR)

    企圖特定放大某mRNA反錄的cDNA。

    6. To detect DNA concentration (real-time PCR 或稱Q-PCR)

    定量 (Quantitative)樣品中某特定核酸濃度的方法。

    7. For random mutagenesis (error-prone PCR)

    應用Taq DNA polymerase不具proof-reading activity,

    藉條件控制 (如加入Mn+2或不等量的四種dNTP) 企圖增加擴增產物的隨機突變率。

    8. For site-direct mutagenesis

    於企圖定位突變的位置上設計primer,操作PCR後便能特定擴增定點突變的產物。

    9. For rapid amplification for cDNA ends (RACE 5’ -end & RACE 3’ -end)

    由mRNA中僅知的序列,以PCR技術分別向5’端及3’端擴增已知序列的兩端cDNA。

    10. Inverse PCR

    DNA中由已知中間序列的部份,向兩端推測未知的部份。

    [註]:上述的內容我幾乎要上三堂課 (9小時)才能完整交代清楚。

    寫下幾點不是重點 (其實我每次寫的都會不一樣),重要是把每一原理弄清楚 (不必背),

    不僅了解PCR應用,也會對一些分子生物的技術更清楚。

    祝同學們學習愉快。

    Dr. 陳皓

    參考資料: www.e-biolearning.con (E流生化教育網版權所有)
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