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匿名使用者 發問時間: 科學生物學 · 1 0 年前

分子生物的一些問題

1.最適合用來建構 genomic library 的 restriction enzyme為

a. Bam H1 b. Sau3A1 請解釋理由

2.最適合用來分析細菌染色體DNA的 restriction mapping 的

restriction enzyme 為 Not1 請解釋理由

3.一株 E.coli 的 genotype如下請解釋此為何菌之 lacZ 基因的表現情形及 phenotype 的理由

...........................................................lacZ expression...phenotype

-..........................................................-IPTG...+IPTG

F'I(+) O(C) lacZ(-) / I(+) O(+) lacZ(+).....(-).......(+)..........inducible

4.λphage 的 CII protein 能協助從 promoter P(RE) 進行 cI gene 的

轉錄 , 相對於 CAP- cAMP 和 CI represor, 這又是一種不同的

activator 作用方式 , 請說明 CII protein 是如何工作的? 怎麼

知道?

共有4題

可以分開幫我解答沒關係

先感謝幫我解答的各位大大了>"<~~

1 個解答

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  • 最佳解答

    第一題與第二題均與 restriction enzyme 的辨認長度有關。BamHI 辨認六個bp(ggatcc)以機率來看,大約每4096bp會出現一次。這樣建立的library數量比較容易控制,不會太多,如果使用Sau3A1的切位辨認只有4個bp(GATC),以機率而言,每256 bp 就出現一次。4k 出現一次,如果想要釣一個基因出來,大概醫兩個 clone 就可以完全不蓋。如果是 256K 出現一次,那需要很多 clone 才能完全覆蓋,會增加操作麻煩,也不實際。還有一個是準備多少 clone 才能達成覆蓋全部genomic 的問題。每個 clone 越短需要越多的 clone 才能完全覆蓋。這樣在釣基因的時候會操作上會增加很多clone,會很不好操作!

    第二題一樣,restriction mapping,切成太多段一樣很難處理,NotI 平均16K一個切位,這樣才不會太多段。

    寫的有點亂,希望你能看得懂!

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