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匿名使用者 發問時間: 科學化學 · 9 年前

trypsin後加入medium的作用為何?

細胞實驗時..其中一個程序:為何使用trypsin在培養箱等待5min.之後加入"培養基"吹吸後.將所有液體取出至入離心管內.離心!

此時..為何加入培養基?

1 個解答

評分
  • 9 年前
    最佳解答

    版主 您好

    Trypsin為胰蛋白酵素,其作用為分解細胞與瓶壁之附著蛋白 , EDTA為chelating agent,其作用為去除Ca2+、Mg2+等離子。trypsin與EDTA二者共同作用,可使附著之細胞自瓶壁脫落。

    但 trypsin作用時間不可太久(所以僅有5分鐘),否則可能對細胞造成傷害或導致細胞死亡!!

    trypsin作用完後加入適量含血清之新鮮培養基,可以終止trypsin作用﹙因血清中含有trypsin inhibitor,可以終止trypsin作用﹚。

    您可以參考國家衛生研究院細胞庫網站資料有關細胞繼代培養之步驟,Trypsin-EDTA為收集吸附型細胞常用之方法,加入先新鮮medium的作用在3.1.3.2有特別說明。

    http://w3.nhri.org.tw/cellbank/c/c_1_7.htm

    參考資料: 自己的實驗經驗+證明資料
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